KULTUR JARINGAN KELAPA SAWIT

Perbanyakan bahan tanam kelapa sawit melalui budidaya jaringan diadopsi dari IRHO, Perancis dengan beberapa modifikasi sehingga dapat menghasilkan klon yang berkualitas. Teknik perbanyakan klon yang dilakukan oleh PPKS melalui tahapan (1) penentuan eksplan/ortet, (2) persiapan media, (3) penanaman dan sub kultur (pemindahan ke media baru), dan (4) aklimatisasi.

1.      Penentuan Eksplan/ Ortet

Ortet atau daun muda (dalam  bahasa Jawa disebut umbut) merupakan material/eksplan dalam budidaya jaringan kelapa sawit. Ortet diambil dari Tenera (D x P) terbaik yang telah diseleksi oleh Divisi BRD dan diobservasi/diamati selama ± 10 tahun (Gambar 11.). Tanaman yang digunakan sebagai sumber eksplan memiliki keunggulan baik dari karakter generatif, vegetatif, maupun karakter lainnya.

(a)                                             (b)

Gambar 11. Proses pengambilan ortet kelapa

Ortet tanaman kelapa sawit (a) Jaringan daun muda/ pupus (b)

Sumber : Pusat Penelitian Kelapa Sawit

Pengambilan sumber eksplan berupa daun muda dari ortet dapat lebih dari satu kali, karena ortet tersebut tidak mati. Keunggulan penggunaan daun muda sebagai eksplan yaitu dapat diperoleh banyak potongan eksplan dari satu tanaman, eksplannya steril karena masih terbungkus pelepah daun, dan waktu penumbuhan kalus tidak terlalu lama. Saat ini sumber eksplan yang digunakan tidak hanya terbatas pada penggunaan jaringan daun muda saja, tetapi dari akar dan bunga. Penggunaan akar sebagai eksplan jarang digunakan karena tingkat kontaminasinya sangat tinggi mencapai 90 – 95%, sedangkan penggunaan bunga sebagai eksplan memiliki kelemahan yaitu butuh waktu yang lama dalam  menumbuhkan kalus, selain itu jumlah eksplan yang dihasilkan juga sedikit (Ginting dan Fatmawati, 2003).

Ortet yang berasal dari kebun dibawa ke laboratorium untuk dipotong dan ditanam dalam media. Helai daun yang digunakan yaitu daun ke -4 sampai -8, dipilih 4 helai daun terbaik dan dipotong menjadi 25 bagian secara melintang (Gambar 12.a). Tiap bagiannya diambil 20 lembar sehingga dihasilkan 2000 eksplan berukuran 1 cm x 1 cm (Gambar 12.b).

(a)                                                                (b)

Gambar 12. Eksplan yang digunakan dalam kultur kelapa sawit

Pemotongan eksplan (a) Potongan eksplan yang telah disterilisasi (b)

Sumber : Pusat Penelitian Kelapa Sawit

Sebelum potongan eksplan ditanam dalam media, eksplan harus disterilisasi terlebih dahulu dengan merendam eksplan dalam larutan Ca-hipoklorit (40 g/l) selama 10 – 20 menit, kemudian ditiriskan dan dicelupkan kembali dalam larutan gula (30 g/l) selama 15 menit (Ginting dan Fatmawati, 2003).

2.      Persiapan Media

Media merupakan faktor terpenting yang menentukan keberhasilan dalam budidaya jaringan karena berperan sebagai sumber energi bagi pertumbuhan dan perkembangan eksplan. Untuk menghasilkan planlet yang siap diaklimatisasi ke lapangan, eksplan mengalami fase pertumbuhan dan perkembangan yang berbeda-beda sehingga membutuhkan media yang berbeda dalam setiap fasenya. Media yang digunakan dalam budidaya jaringan kelapa sawit adalah media MS (Murashige and Skoog, 1962) dengan modifikasi dari IRHO, Perancis. Media tersusun dari berbagai unsur kimia yang terdiri dari unsur makro, mikro, vitamin, mineral, hormon, dan zat pengatur tumbuh (ZPT). Media budidaya  jaringan kelapa sawit terdiri dari 2 jenis yaitu media padat dan cair. Berdasarkan fase pertumbuhan eksplan digunakan 8 jenis media (Tabel 7.) dalam budidaya jaringan kelapa sawit

Tabel 7. Media budidaya jaringan kelapa sawit

No	Jenis media	Bentuk media	Kegunaan
1	Media 034	Padat	Pertumbuhan eksplan dan induksi kalus
2	Media 058	Padat	Pertumbuhan kalus
3	Media 129	padat	Pertumbuhan embrio
4	Media 144	padat	Pertumbuhan plantula
5	Media 163	Cair	Pertumbuhan pupus
6	Media 050	Cair	Induksi akar
7	Media 143	Padat	Pertumbuhan akar (semu)
8	Media R	Cair	perkembangan akar (utuh)

Sumber : Pusat Penelitian Kelapa sawit

Pembuatan media dalam budidaya jaringan kelapa sawit harus mengikuti standar operasional pembuatan media dengan tahapan – tahapan yang sistematis. Bahan – bahan kimia (unsur makro, mikro, vitamin, mineral, hormon, dan ZPT) yang akan digunakan ditimbang dengan timbangan analitik, kemudian semua bahan dicampurkan secara berurutan dalam wadah (fiole) dan ditambah aquades dan pH media diatur menjadi 5. Selanjutnya, media dipanaskan dalam kontainer dandang hingga mendidih, dalam pembuatan media padat ditambahkan agar (Difto- Bacto, Gelrite)  sedangkan pada media cair tidak perlu dipanaskan dan ditambah agar. Setelah mendidih media didistribusikan dalam testube atau plakon distributor media accuramatic 5, kemudian disterilisasi dalam autoklaf selama 20 menit  pada suhu 120⁰C dan tekanan 0,11 atm.

3.      Penanaman dan pemindahan / transfer (sub kultur)

Eksplan yang telah disterilisasi selanjutnya ditanam dalam media 034 dan disimpan dalam ruang gelap dengan suhu 27⁰ C dan kelembaban 50-60%  untuk menginduksi kalus. Pembentukan kalus merupakan tahapan yang paling penting dalam budidaya jaringan kelapa sawit. Kalus primer akan tumbuh dalam waktu ± 6 bulan kemudian kalus dipindah ke media induksi embrio somatik menggunakan media 058 dan harus dipindah ke media baru (sub kultur) setiap 2 bulan agar nutrisi dan hara dalam media tetap tersedia sehingga pertumbuhan dan perkembangan eksplan tetap berlangsung. Jika kalus tidak tumbuh dalam waktu 24 bulan maka eksplan harus segera dimusnahkan.

(a)                                                      (b)

Gambar 13. Eksplan dalam media kultur

Kalus dalam media 058 (a) Embrio dalam media 129 (b)

Sumber : Pusat Penelitian Kelapa Sawit

Pertumbuhan kalus dalam media 058 akan menghasilkan embrio (Gambar 13.a). Selanjutnya embrio ini ditanam dalam media 129 (Gambar 13.b) agar berkembang menjadi pupus muda (plantula). Plantula ditanam dalam media 144 (Gambar 14.) agar terbentuk pupus. Pupus adalah plantula yang akar, batang, dan daunnya sudah terlihat jelas perbedaannya. Pupus ditanam dalam media 163 (Gambar 15.) hingga tingginya mencapai 5 cm. Embrio yang tidak menghasilkan pupus muda di pindah ke media induksi pupus 144 atau 129.

Gambar 14. Plantula dalam media 144

Sumber : Pusat Penelitian Kelapa Sawit

Pupus ditanam dalam media induksi perakaran 050 selama 5 hari. Setelah 5 hari pupus yang telah memiliki akar dipindah ke media perakaran 143 selama 2 bulan. Pupus yang belum berakar dipindah ke media perakaran setelah 4 – 6 minggu, pemindahan dapat diulang hingga pupus memiliki akar primer dan tambahan. Setelah 2 bulan dalam media perakaran 163 pupus dipindah ke media R (pengerasan) untuk memperkuat akar sebelum diaklimatisasi. Setelah 2 bulan dalam media R pertumbuhan akar pupus sudah sempurna. Kecambah kelapa sawit yang telah memiliki akar dan tunas disebut planlet.

Gambar 15. Pupus dalam media cair (163)

Sumber : Pusat Penelitian Kelapa Sawit

Dalam proses pemindahan (sub kultur) eksplan ke media baru menggunakan alat – alat seperti pinset, skalpel, kertas alas, harus melalui tahap sterilisasi terlebih dahulu. Sterilisasi dilakukan yaitu dengan cara mencelupkan alat tersebut dalam alkohol kemudian dibakar di api selama beberapa saat hingga alat berwarna kemerahan, lalu alat dapat digunakan untuk untuk mengambil eksplan, sedangkan kertas alas berupa koran/kertas harus disterilisasi juga dengan memasukkan kertas ke dalam oven sebelum digunakan.  Penanaman dan proses pemindahan eksplan ke media baru (sub kultur) dilakukan di dalam LAFC (Laminair Air flow Cabinet). Sebelum LAFC digunakan untuk penanaman dan pemindahan eksplan harus disterilisasi terlebih dahulu dengan menghidupkan sinar ultraviolet selama beberapa saat dan ketika akan melakukan penanaman dan pemindahan maka sinar ultraviolet harus dimatikan karena berbahaya bagi kesehatan.

4.      Aklimatisasi

Planlet hasil budidaya jaringan harus diaklimatisasi terlebih dahulu sebelum ditanam pada media alami pertumbuhan agar planlet tersebut tidak mati akibat tekanan lingkungan. Planlet dicuci bersih dengan air sebelum diaklimatisasi, sebelumnya media aklimatisasi telah dipersiapkan di dalam ruang screen house. Media tanam yang digunakan yaitu campuran tanah, pasir, dan kompos dengan perbandingan 10 : 1 : 3 dalam polybag kecil. Sebelum ditanam, planlet direndam dalam larutan Dithane (2 g/l) agar terhindar dari infeksi jamur. Penanaman planlet dalam plastik harus diberi sungkup diatasnya agar terhindar dari sinar matahari secara langsung dalam waktu ±1 bulan. Pemberian sungkup merupakan proses adaptasi planlet terhadap lingkungan alami agar planlet tidak mati karena terkena sinar matahari secara langsung. Setelah 1 bulan, bibit dipindah ke ramet yaitu tempat penanaman bibit muda dalam tempat yang ditutupi plastik transparan selama ½ bulan.

 

(a)                                         (b)                                   (c)

Gambar 16. Planlet hasil budidaya jaringan kelapa sawit

Planlet siap tanam (a) Planlet yang diberi sungkup (b) Ramet (c)

Sumber : Pusat Penelitian Kelapa Sawit